摘 要 从果蔬农药残留检测技术几个技术关键点入手，着重对测试仪器的选择、提取方法、药品试剂、萃取时间、静置时间等几方面进行试验探究，总结出在日常监管中果蔬农残速测有效方法，提高速测质量和数量，提高工作效率具有指导意义。
关键词 农药残留；快速检测；方法；效率
中图分类号：S481 文献标志码：B DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2018.06.062
我国自古就是农业大国，而今又是世界上人口最多的国家。俗话说“民以食为天，食以安为先”，食品安全是举世关注的大问题，关系到千家万户百姓健康、关系到人民生命安全、关系到国计民生。随着我国人口的不断增长、种植面积的不断扩大，果树蔬菜、害虫问题越来越严重。在我国农业生产中，农药的使用范围与程度也逐渐增加，无论是对提高蔬菜、粮食的产量、质量有着重要的影响。由于农药的过量使用和滥用，农药在食物中的残留问题和引发中毒的情况变得较为突出。与此同时，随着人们生活品质和品味的提高，对农产品质量安全意识越来越强，食品安全已被当前社会普遍关注。因此，检测农药并尽量消除农药残留成为人们十分关心的问题。而农药残留的快速检测成为农产品质量安全监管的重要措施和衡量农产品质量安全水平重要指标之一。我国各级政府对食品安全日益重视，已经采取了许多重大措施，食品安全状况有了较大的改善，农药残留的快速检测成为区县级检验检测机构及农产品安质量全监管工作重要部分，因此，探索农药残留快速检测新方法，提高快速检测效率成为基层检测人员亟待解决的问题，对于防范农产品质量安全风险具有重要意义。
1 我国果蔬农药残留检测的发展
我国最早是在20世纪50年代后期开始对农药残留的检测工作，农药残留的检测工作经过几十年的发展，检测方法及检测仪器都有了长足的发展，由最初采用的比色法、容量法等灵敏度较低的检测方法发展到检测农药更为优越的薄层色谱技术、气相色谱仪、液相色谱仪等技术。对于样品中残留农药的提取技术主要有振荡法、索氏提取法、超声波提取法、提取溶剂、吸附法、浸渍漂洗法、消化法以及匀浆捣碎法等，但这些技术方法存在着样本用量较大、毒性大、检测试剂用量较多、选择性差以及提取率低等缺点。近十年来，我国引进了国外较为先进的仪器设备和检测技术，如固相萃取、微波萃取、固相微萃取、超临界提取以及加热溶剂萃取等。用这些技术方法提取样本中农药残留，操作简单快捷、检测试剂用量少、选择精确度高、提取率高等诸多优点，而且操作省时、省力。后来这种农药多残留物快速检测技术不断得到发展和完善，并在蔬菜、水果等食品中农药残留快速检测得到广泛应用，为适应不断发展的检测和监管任务需要，果蔬农药残留快速检测也在不断地改进和发展。
2 农药残留快速检测技术的原理及常用设备
2.1 农药残留快速检测技术的原理
目前，我国农药残留中较为突出的是蔬菜和水果中的残留问题，其中最主要是有机磷农药和氨基甲酸酯类农药残留问题。有机磷农药高效性及不规范使用，成为蔬菜和果品的潜在不安全因素，有机磷农药中毒事件时有发生，因此农药的检测重点是有机磷和氨基甲酸酯类农药。我国常用的检测方法有酶抑制法、免疫分析法和生物传感器法，重庆地区检测机构常用的检测方法有酶抑制分光光度法。酶抑制法是利用有机磷及氨基甲酸酯类农药可特异性地抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酯酶（AChE）的活性，造成神经传导介质乙酰胆碱的积累，影响正常传导，使昆虫中毒致死这一毒理学原理，将碱酯酶和有机磷或氨基甲酸酯类农药反应，酶的活性被抑制，胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯（红色）水解为乙酸和靛酚（蓝色），有机磷或氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶有抑制作用，使催化、水解和变色的过程发生变化，由此可判断样品中是否含有有机磷或氨基甲酸酯类农药残留。通过特定的显色反应了解酶的活性被抑制的程度，从而得出检测样本被污染的程度。
2008年开始，重庆市在县级以上农业行政主管部门设立专门的机构并配备农残速测设备，按照属地管理原则，辖区内的较大的农产品生产基地的产品和较大的蔬菜市场的上市品种进行抽检和监管，到2015年又将农产品质量安全监管体系延伸到乡镇级，在各乡镇成立农产品质量安全监管站，各站配备一套农药残留快速检测的设备，对本辖区内较大的生产基地的农产品产品和蔬菜市场的上市品种进行抽样检测。而且快速检测的方式多为现场检验和对大量样品的筛选，这就要求农药残留的快速检测技术所使用的检验方法反应速度快、检测效率高。近几年发展起来的酶抑制法具有简单、快速、适合现场检测和粗筛等优点。
2.2 常用设备
目前，常用国产农药残留速测仪均为多通道光路设计，可同时检测多个样品，具有简单、廉价的特点。直接显示检测结果，还可带有数据接口。目前，重庆市和县区农产品质量监督部门、乡镇监管站日常检测的主要速测仪器有安鑫宝WT-51A，欧达科仪PR-202、上海瑞鑫科技仪器有限公司的CNY-817C等多通道型仪器。常用的试剂有酶，乙酰胆碱酯酶（AChE）；底物：硫代乙酰胆碱或碘化代丁酰胆碱或碘化硫代乙酰胆碱；显色剂：二硫代二硝基苯甲酸或2，6-二氯靛酚。经一定时间反应后，利用分光光度法，根据吸光值的变化计算ChE的抑制率，判断有机磷氨基甲酸酯类农药残留量是否超标，规定抑制率≥50%（阳性）为农药超标。比色法（分光光度法）检出限一般检出时间为3 min。
3 农药残留快速检测的几个关键技术
从农药残留快速检测基本过程（采样剪碎、提取残留液、酶显色反应、仪器检测）来看，想要提高检测速度和检测效率需從以下几个关键技术着手。
3.1 取样
叶类菜取叶尖部分，果菜取果皮，用剪刀剪成1 cm大小，称取2 g。对辣椒、萝卜、番茄等汁液中有酶破坏性或深色物质褪色的物质的果蔬和能使结果产生假阳性蔬菜如芹菜，采取整株浸泡或淋喷方式方法。
3.2 提取
采用提取液对样品中的农药溶解提取，提取的时间一般为2～10 min。
3.3 试剂的选择
常用的快速检测试剂是提取液、酶、显色剂和底物。通常用的试剂都是从仪器生产厂家专门订购或配送。
3.4 静置时间的确定
指加入酶和显色剂后再到加入底物之间的时间。经实践发现，这个时间在6～12 min的检测结果差异不大。
3.5 检测时间的设定
这个是指比色皿放入比色池内，盖好盖板，按启动键开始检测到出示结果这段时间，设置时一般选择3 min。
4 探索和结论
由于近年来区县机构和乡镇监管站的监管和检测任务不断加重，摸索农药残留快速检测方法步骤，努力提高快速检测方法的检测效率和准确率，为基层检测人员能保质保量完成检测任务，也为长寿区农产品质量安全筑牢一道屏障具有十分重要的意义。
2016—2017年，在实施果蔬菜农药残留快速检测实验中，从试剂的选择、对照的处理，以及检测步骤中取样、提取、酶显色反应、仪器检测几个关键技术的操作中，通过大量的对比和摸索，总结出了几点行之有效的经验，供基层农药残留快速检测人员参考。
1）取样。取样时要注意取样的部位和准确称量，并防止交叉污染以保证检测的准确性。
2）提取。配制提取液时要注意用蒸馏水冲洗试剂的包装袋，并不断搅拌使试剂充分溶解，必要时用温水浴加快溶解。加提取液时可把样品放在托盘上，逐一加入一定量（一般是10 mL）的提取液，然后放到振荡器中振荡，2～3 min后停止，再一一过滤。
3）试剂药品的管理。未经配制的药剂应放在冷冻室里保存，配好的提取液可室温保存，但配好的酶、底物以及显色剂宜放在冰箱的冷藏室保存。检测当天一定要根据要检测样品的数量一次配备足够的试剂，不同厂家或同一厂家不同批次的试剂都要分开做，且要注意酶和底物浓度一定要一致，否则检测结果会出现无法显示的现象或结果不准确。
4）加酶和显色剂反应时间。因为显色反应时间一般在10 min左右，仪器检测时间为3 min，所以提高速度和效率在这个关键时候最有效，1）可以两人一组，一起操作一台仪器，一人一次可以做两三个样品，这样一次可以做四五个样品；2）统筹时间安排，在第一组样品反应5 min时，准备第二组样品加酶和显色剂，以此类推，这样在以后的每13 min内可以检测8～10个样品。
5）对照的处理。影响酶的活性和稳定性的因素很多，最常使用的酶和底物生产厂家不同，同一厂家不同批次的产品质量也不一定完全一致，会严重影响速测结果的准确性。所以在一天的检测实验中尽量只用一个对照，如果遇到试剂不够需重新配制时，必须重新配制对照，否则同样会出现无法显结果，这样就会耽误时间。也可以采用对照和样品同时做，把对照放在第一個通道里，在检测时按“对照”按键，这时仪器就默认第一个为对照，后面几个通道作为样品做出判断。
（责任编辑：赵中正）