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液相色谱—串联质谱联用技术测定酒类产品中γ—氨基丁酸

时间:2022-05-14 10:40:03 浏览次数:

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w㞻t_V材料与方法

1.1 试验仪器和试剂

试验用液质联用仪:液相色谱四极杆串联质谱(电喷雾电离源(ESI))安捷伦6410,液相色谱系统包括自动进样器。

试验试剂:γ-氨基丁酸标准样品(含量为99%,SIGMA公司生产),甲醇(色谱纯)。

1.2 仪器分析条件

1.2.1 液相色谱条件。流动相组成:0.1%乙酸水溶液+甲醇(4+6,体积比);流速:200 μL/min;注射体积:20 μL;柱温:26 ℃。

1.2.2 质谱条件。离子源:电喷雾离子源(ESI);扫描方式:正离子扫描;检测方式:多反应监测(MRM);干燥气温度:350 ℃;干燥气流速:10 L/min;雾化器压力;275.8 kPa;毛细管电压:4 000 V。

1.3 试验方法

白酒:直接移取1 mL试样过0.22 μm滤膜;葡萄酒和果酒:移取5 mL试样冷冻离心(10 000 r/min,15 min,2~4 ℃),取上清液过0.22 μm滤膜,根据其含量直接或稀释液相色谱—质谱/质谱测定。

2 结果与分析

2.1 γ-氨基丁酸分析条件确定

γ-氨基丁酸化分子量103,在液质里选择正离子模式,得到母离子[M+1]为103.9,在一定碰撞电压和能量下,失去NH3得到子离子M/Z:86.9,再失去1个H2O得到子离子M/Z:68.9,具体碰撞条件见表1,母离子和子离子在液质中形成见图1,色谱图见图2。

2.2 前处理方法

γ-氨基丁酸在白酒含量较低,一般直接过0.22 μm滤膜进样测定。葡萄酒和果酒冷冻离心(10 000 r/min,15 min,2~4 ℃),去除部分酒石酸盐类、单宁、果胶、色素等,取上清液过0.22 μm滤膜,根据其含量直接或稀释进样。

2.3 线性关系和检出限

配制不同浓度梯度的γ-氨基丁酸溶液,其浓度分别为0.01、0.02、0.04、0.10、0.20、0.50 mg/L。在试验设定条件,将γ-氨基丁酸的质量浓度(mg/L)作为横坐标X,将γ-氨基丁酸的峰面积作为纵坐标Y进行线性回归,确定回归方程为Y=177.4X,回归系数r2=0.999 1,具有良好的线性关系。当信噪比(S/N)=3时,仪器检出限为0.003 mg/L。

2.4 方法的精密度和回收率

取不含γ-氨基丁酸的白酒10 mL作为空白基质,分别添加5 mg/L标液0.08、0.20、0.40 mL共3组,每组6份,进行平行试验。按照试验方法进行前处理和仪器分析测定,计算回收率和精密度试验数据,结果见表2。

从表2可以看出,采用该方法能够使回收率达到85%以上,相对标准偏差RSD小于6%。采用该方法能够获得较高的测量精密度和准确度。

2.5 样品测定

依据《国家食品安全标准 食品添加剂使用标准(GB2760-2014)》,化学合成的γ-氨基丁酸可作为在食品生产中能够作为香料使用,但要控制使用量和使用范围。在白酒中,γ-氨基丁酸是按生产需要适量使用。在市场抽取白酒样品近50组,运用液相色谱—四极杆串联质谱联用技术测定,共检出5组样品含有γ-氨基丁酸,含量为0.1~0.8 mg/L。

3 结论

运用液相色谱—四极杆串联质谱联用技术测定酒类中γ-氨基丁酸,当浓度在0.01~0.50的范围内,表现出良好的线性关系。该方法具有前处理方法简单、测定过程快速、灵敏度高、测定结果准确等优点。

4 参考文献

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